就在昨天，國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布了一條《關(guān)于印發(fā)新冠病毒核酸篩查稀釋混樣檢測(cè)技術(shù)指引的通知》的公告，在朋友圈里被瘋狂轉(zhuǎn)發(fā)，只因里面的一句話(huà)“稀釋混樣檢測(cè)必須提取核酸，禁用“一步法””。

從技術(shù)的角度來(lái)講這句話(huà)并無(wú)不妥，一步法大多是采用直接裂解的方式，然后進(jìn)行離心或者不離心之后擴(kuò)增，這種方法之所以不能被用于混樣檢測(cè)的原因也是混樣檢測(cè)在一開(kāi)始被很多檢驗(yàn)人diss的原因，多份標(biāo)本混合就意味著樣本被稀釋了，稀釋也就意味著存在漏檢的風(fēng)險(xiǎn)。

但是隨著國(guó)內(nèi)多地開(kāi)始大規(guī)模進(jìn)行核酸普篩，隨之而來(lái)的是大量的樣本，那么混樣檢測(cè)就被再次提上了討論桌，在疾控、血站等，針對(duì)血樣進(jìn)行混樣其實(shí)是比較常見(jiàn)的一種方式，但血樣畢竟是勻質(zhì)樣本，而新冠又是非勻質(zhì)的拭子樣本，也是導(dǎo)至當(dāng)下疫情的罪魁禍?zhǔn)?，那新冠混樣行不行得通呢?/span>

最開(kāi)始在武漢進(jìn)行“十天大會(huì)戰(zhàn)”的時(shí)候被曝光出來(lái)說(shuō)，有的地區(qū)在采樣的時(shí)候，把十幾個(gè)拭子放到一個(gè)保存管里，但最終官方也沒(méi)有給出一個(gè)明確的說(shuō)法。

然后再北京突發(fā)疫情的時(shí)候，北京疾控出了一條有關(guān)混樣的規(guī)范文件《北京市新型冠狀病毒核酸混合檢測(cè)采樣、樣本處理及結(jié)果判定技術(shù)指南》，里面是這么描述的“進(jìn)行大規(guī)模人群檢測(cè)時(shí)，可采用5-10份標(biāo)本混檢進(jìn)行初篩的方法，提高檢測(cè)效率，降低檢測(cè)成本”。

我們發(fā)現(xiàn)其實(shí)在武漢和北京所使用的混樣方式，是直接來(lái)混合樣本，然后統(tǒng)一提取和檢測(cè)。

但當(dāng)我們仔細(xì)閱讀衛(wèi)健委的這份文件的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，里面是這么描述的：“將采集的數(shù)個(gè)樣本（原則上不超過(guò)5個(gè)）各取200μl進(jìn)行充分混合，形成混合待檢樣本，每一次上樣擴(kuò)增中，80個(gè)加樣孔用于加入混合樣本（如5混1，總計(jì)80*5個(gè)單樣本）；10個(gè)加樣孔用于單樣本（單樣本來(lái)自上述80*5個(gè)原液的隨機(jī)樣本）”。

不知道大家有沒(méi)有注意一些細(xì)節(jié)，在這里建議的混樣個(gè)數(shù)是5個(gè)，每個(gè)200μl，加起來(lái)正好是1mL，我想這也是為什么建議5混1的原因，不然就會(huì)出現(xiàn)混液體積太大或單個(gè)體積太小。不要說(shuō)可以離心富集，這是病毒呀，沒(méi)個(gè)大幾萬(wàn)轉(zhuǎn)速能離心下來(lái)呀。

關(guān)于10個(gè)加樣孔用于單樣本，這一條是為什么呢？這里的邏輯是通過(guò)隨機(jī)抽樣來(lái)評(píng)估整體，通過(guò)隨機(jī)單樣本的測(cè)試來(lái)在一定程度上評(píng)估此次混樣的效果。

關(guān)于室內(nèi)質(zhì)控的設(shè)計(jì)也是非常的用心,“每批上樣檢測(cè)應(yīng)當(dāng)在剩余加樣孔中設(shè)置1個(gè)弱陽(yáng)性質(zhì)控樣本和三個(gè)陰性質(zhì)控樣本（2份生理鹽水和1份陰性混合樣本）。3份陰性質(zhì)控樣本隨機(jī)放在臨床樣本中間?！?/strong>

這次衛(wèi)健委發(fā)布的這版混樣檢測(cè)的技術(shù)指引是把能考慮到的問(wèn)題都考慮進(jìn)去了，是目前最完善的混樣檢測(cè)的技術(shù)方案，關(guān)于其中提到的“稀釋混樣檢測(cè)必須提取核酸，禁用“一步法””，我想大概的原因是一步法普遍上樣的體積比較小，采用直接裂解，核酸純度不高，存在蛋白質(zhì)、多糖對(duì)結(jié)果會(huì)有影響。

但是這里說(shuō)的是混檢樣本禁用“一步法”，單樣本檢測(cè)，一步法還是有很多優(yōu)勢(shì)的，況且這也是國(guó)內(nèi)技術(shù)最接近分子POCT的解決方案。

混樣檢測(cè)的目的是提高檢測(cè)效率，降低檢測(cè)成本，綜合下來(lái)看，目前衛(wèi)健委的這版方案是最完美的，如果成本因素可以往后放一放，還有一種混樣檢測(cè)方案也是蠻好的，就是上海之江在推廣的濃縮方案，通過(guò)單樣本提取核酸，磁珠轉(zhuǎn)移混合的方式進(jìn)行濃縮。這種方案采用多個(gè)提取試劑+1個(gè)檢測(cè)試劑組合，能降低檢測(cè)試劑的成本，但是提取試劑的成本并沒(méi)有降很多。

混檢是解決大樣本檢測(cè)壓力的方案，通過(guò)組合優(yōu)化之后，能盡可能避免技術(shù)缺陷對(duì)結(jié)果的影響。