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化學(xué)發(fā)光、免疫分析常見(jiàn)問(wèn)題匯總!


時(shí)間分辨免疫技術(shù) 酶免 膠體金法 化學(xué)發(fā)光 四種方法的區(qū)別?

答:
1學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA):是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合,用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測(cè)分析技術(shù)。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時(shí)間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)最新免疫測(cè)定技術(shù)。

2 時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定(TRFIA):是以鑭系元素標(biāo)記抗原或抗體,并與時(shí)間分辨測(cè)定技術(shù)結(jié)合而建立起來(lái)的一種新型非放射性微量免疫分析技術(shù),它根據(jù)鑭系元素螯合物的發(fā)光特點(diǎn),用時(shí)間分辨技術(shù)測(cè)量熒光,同時(shí)檢測(cè)波長(zhǎng)和時(shí)間兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行信號(hào)分辨,可有效地排除非特異熒光的干擾,極大地提高了分析靈敏度。

3酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA):是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù),ELISA過(guò)程包括抗原(抗體)吸附在固相載體上稱為包被,加待測(cè)抗體(抗原),?再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體(抗原),生成抗原(抗體)--待測(cè)抗體(抗原)--酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物,再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計(jì)的光吸收計(jì)算抗體(抗原)的量。待測(cè)抗體(抗原)的定量與有色產(chǎn)生成正比。靈敏度比上面兩種方法差。

4.膠體金法:由膠體金標(biāo)記技術(shù)發(fā)展起來(lái)的膠體金免疫快速診斷技術(shù),主要有兩種:快速斑點(diǎn)免疫金滲濾法和膠體金免疫層析法。后者具有操作簡(jiǎn)便(浸入液體中就行)、快速(全程5~10分鐘搞定)、無(wú)需儀器設(shè)備(結(jié)果目測(cè)就OK)、試劑穩(wěn)定、成品易于保存(保質(zhì)期1~2年)等優(yōu)點(diǎn),是科學(xué)研究和臨床診斷的有力工具。
 

N-乙酰葡萄糖苷酶


答:
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷,也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。該酶廣泛存在于各種組織器官、體液、血細(xì)胞中,是溶酶體中的一種酸性水解酶。其測(cè)定方法有比色法和熒光光度法,血、尿NAG活性測(cè)定對(duì)反映腎實(shí)質(zhì)病變,尤其是急性損傷和活動(dòng)期病變更 敏感,主要用于早期腎損傷的監(jiān)測(cè)和病情觀察。

(1) 腎小管疾病:重金屬(汞、鉛、鎘等)及藥物性腎損傷、缺血、缺氧、失血、休克等均可引起NAG活性增加。(2)腎病綜合征:尿NAG常明顯增加,緩解期下降,復(fù)發(fā)時(shí)迅速回升,故可作為臨床觀察指征。腎小球腎炎急性期變化較大,但與腎小管損傷相比,變化幅度較小。(3) 尿路感染的定位診斷:急、慢性腎盂腎炎尿NAG上升,能與單純性膀胱炎區(qū)別??捎糜谠缙谏夏蚵犯腥镜脑\斷。(4)腎移植排斥反應(yīng)的監(jiān)測(cè):腎移植排斥反應(yīng)早期NAG即可升高,比尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率更敏感。(5)糖尿病腎痛早期診斷:糖尿病腎病尿NAG升高,用于本病的早期診斷優(yōu)于尿白蛋白及β2-微球蛋白。

生化分析儀定標(biāo)


答:
定標(biāo)就是要找出一個(gè)參考點(diǎn),就是一個(gè)K值(或F值)。它是由儀器與試劑狀態(tài)確定下來(lái)的。當(dāng)我們測(cè)定一個(gè)標(biāo)本時(shí),無(wú)論您是用手工的方法或全自動(dòng)生化分析儀,測(cè)出來(lái)的值只是一個(gè)吸光度,這個(gè)吸光度對(duì)我們沒(méi)有什么意義,我們要把這個(gè)吸光度轉(zhuǎn)化成一個(gè)濃度或是酶的活性。那就要乘上一個(gè)K值,計(jì)算并打印出來(lái)的結(jié)果對(duì)我們就有意義了。

K值就是我們通過(guò)定標(biāo)找出來(lái)的。一般上最低要求是由試劑空白與標(biāo)準(zhǔn)品。經(jīng)過(guò)儀器測(cè)定出兩個(gè)吸光度。?K=標(biāo)準(zhǔn)濃度/(A標(biāo)準(zhǔn)-A試劑空白) 標(biāo)準(zhǔn)液的濃度我們是知道的,這兩個(gè)吸光度可以由儀器測(cè)出,這樣就得出一個(gè)K值。無(wú)論什么樣的標(biāo)本,用其吸光度乘以K值我們就得到了答案。因此,K值具有非常決定性的意義,可以決定標(biāo)本的準(zhǔn)確性

單純皰疹


答:皰疹病毒是一種存在包膜構(gòu)造的雙鏈DNA病毒, 大量生存于自然界內(nèi), 可侵入人體和動(dòng)物體會(huì)發(fā)生感染, 病毒通常經(jīng)由黏膜、皮膚、神經(jīng)組織等感染機(jī)體而致相關(guān)的病變。其可分成HSV-1與HSV-2兩種血清類型,感染HSV-1后主要會(huì)導(dǎo)至咽炎、唇皰疹、角膜炎, 嚴(yán)重者會(huì)造成散發(fā)性腦炎等危險(xiǎn)疾病;HSV-2主要經(jīng)由受損皮膚和黏膜侵入而致生殖器皰疹。

這些年來(lái)有研究表明, 引發(fā)生殖器皰疹病毒的病原體中, HSV-1與HSV-2都存在重要作用,而感染這兩種病毒后其可長(zhǎng)期潛伏于機(jī)體內(nèi)。

降鈣素


答:
PCT是血清降鈣素(CT)的前肽物質(zhì),是由116個(gè)氨基酸組成的糖蛋白質(zhì),在正常生理情況下,由甲狀腺C細(xì)胞分泌產(chǎn)生。健康人血液中的PCT濃度非常低,小于0.05 ng/ml。在炎癥刺激特別是細(xì)菌感染或膿毒血癥狀態(tài)下,機(jī)體各個(gè)組織、多種細(xì)胞類型均可產(chǎn)生PCT并釋放進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)。

PCT是近年來(lái)普遍使用的細(xì)菌感染生物標(biāo)志物,其最初在ICU中使用較為廣泛,由于臨床價(jià)值明顯,逐漸推廣到其它科室。其在全身細(xì)菌性感染診斷和鑒別、對(duì)療效的監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷等領(lǐng)域,相比傳統(tǒng)的WBC、CRP以及各種炎癥反應(yīng)因子(IL-2\IL-6\細(xì)菌內(nèi)毒素)更有臨床實(shí)用價(jià)值。

微生物平板


答:
微生物培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的最常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無(wú)菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡(jiǎn)稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實(shí)驗(yàn),測(cè)定接種空間雜菌數(shù)等。
 

肌酐定標(biāo)


答:對(duì)于肌酐定標(biāo)大多數(shù)檢驗(yàn)室習(xí)慣以單一標(biāo)準(zhǔn)來(lái)校準(zhǔn)結(jié)果, 原則上應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線呈通過(guò)原點(diǎn)的直線時(shí)才可作這樣的處理;呈不通過(guò)原點(diǎn)的直線關(guān)系時(shí), 至少應(yīng)使用兩點(diǎn)定標(biāo);呈拋物曲線狀時(shí), 應(yīng)使用多點(diǎn)定標(biāo)?!皢吸c(diǎn)定標(biāo)”作校準(zhǔn)是有條件的, 如果廠家有關(guān)方法穩(wěn)定性文件或者自建檢測(cè)系統(tǒng)的評(píng)價(jià)中, 已經(jīng)證明該項(xiàng)目性能特點(diǎn)之一的標(biāo)準(zhǔn)曲線是線性關(guān)系, 而且a值幾乎為0, 即Y=b X, 則可以用單點(diǎn)定標(biāo)作校準(zhǔn), 否則則會(huì)存在截距a造成偏差, 離定標(biāo)點(diǎn)較遠(yuǎn)的濃度標(biāo)本會(huì)造成較大偏差。
 

淀粉酶


答:淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)。

1.升高:(1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY顯著增高。發(fā)病后8~12h血清AMY開(kāi)始增高,12~24h達(dá)高峰,2~5天下降至正常。尿AMY約于發(fā)病后12~24h開(kāi)始升高,下降比血清AMS慢,因此,在急性胰腺炎后期測(cè)定尿AMY更有價(jià)值。特別是急性胰腺炎時(shí)。(2)流行性腮腺炎(3)急性闌尾炎、腸梗阻、胰腺癌、膽石癥、潰瘍病穿孔及嗎啡注射后等均可見(jiàn)血清AMY增高,但常低于500U。

2.降低:正常人血清中AMY主要由肝臟產(chǎn)生,故血清與尿中AMY同時(shí)減低主要見(jiàn)于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性膽囊炎等。腎功能障礙時(shí),血清AMY也可降低。
 

孕三項(xiàng)


答:現(xiàn)代婦產(chǎn)科受孕檢查倡導(dǎo)聯(lián)合檢查機(jī)制,采用“孕酮+血人紅毛膜促性腺激素 (β-HCG) +雌二醇”等3種聯(lián)合檢查方式, 可綜合保障檢測(cè)效率。HCG是受精卵著床后, 由絨毛滋養(yǎng)層的合體細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素, 由α、β兩個(gè)亞基組成, 其中β-HCG對(duì)妊娠具有特異性。

血清孕酮在妊娠早期是由卵巢黃體和妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞分泌合成的, 是維持妊娠必要的一種甾體類激素;妊娠8周后主要來(lái)自胎盤(pán), 妊娠12周后胎盤(pán)完全形成, 血清孕酮水平將會(huì)迅速升高, 因此妊娠12周以前, 血清孕酮的水平是穩(wěn)定而且不依賴于孕齡的。雌二醇主要由卵巢分泌, 促使輸卵管黏膜上皮細(xì)胞分泌活動(dòng)增加和纖毛生長(zhǎng)加快, 促進(jìn)受精卵經(jīng)輸卵管運(yùn)行至子宮腔。

D2


答:通常血液中纖維蛋白單體經(jīng)活化因子xIII交聯(lián)后,再經(jīng)活化的纖溶酶水解產(chǎn)生特異的降解產(chǎn)物稱為“纖維蛋白降解產(chǎn)物”。D-二聚體是最簡(jiǎn)單的纖維蛋白降解產(chǎn)物,其質(zhì)量濃度的增加反映體內(nèi)高凝狀態(tài)和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。D-二聚體的臨床檢測(cè)主要應(yīng)用在靜脈血栓栓塞(VTE)、深靜脈血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)的診斷。增高見(jiàn)于繼發(fā)性纖維蛋白溶解功能亢進(jìn),如高凝狀態(tài)、彌散性血管內(nèi)凝血、腎臟疾病、器官移植排斥反應(yīng)、溶栓治療等。
 

線索細(xì)胞


答:線索細(xì)胞是加特納菌或小桿菌(這兩種菌常見(jiàn))感染正常的鱗狀上皮細(xì)胞,使正常的上皮細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,如邊緣不整齊、粗糟、透明度不高等。線索細(xì)胞是指陰道脫落上皮細(xì)胞上粘附大量加特納桿菌等厭氧菌的一種,一般預(yù)示患了細(xì)菌性陰道病,當(dāng)然還要結(jié)合其它幾項(xiàng)重要指標(biāo)來(lái)確診,一般是PH值,胺試驗(yàn)及分泌物性狀等指標(biāo)。

臨床上乙肝兩對(duì)半1、2、4、5陽(yáng)性



抗凝劑


答:抗凝劑--能阻止血液凝固的化學(xué)試劑。

(一)枸櫞酸鹽主要為枸櫞酸三鈉,能與血液中鈣離子結(jié)合形成螯合物,從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉與血液的抗凝比例是1∶9或者1∶4,一般用于凝血和紅細(xì)胞沉降率的檢查。因其毒性小,也是輸血保養(yǎng)液的成分之一。

(二)肝素肝素是一種生理性抗凝劑,廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖,是分散物質(zhì),平均分子量為15000,帶有較多負(fù)電荷。其抗凝機(jī)制較為復(fù)雜,主要是加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)滅活絲氨酸蛋白酶的作用,從而阻止凝血酶的形成,并且有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。常用于血細(xì)胞比容、血pH、血?dú)夥治黾捌渌瘻y(cè)定,是紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)理想的抗凝劑。每管加含肝素1g/L的溶液1mL,在60℃以下烘干備用,可使5~10 mL血液不凝。肝素抗凝血不適于血涂片檢查。因其在瑞氏染色時(shí)會(huì)出現(xiàn)背景偏藍(lán),不適全血液學(xué)一般檢查,也不適合凝血因子的檢查。

(三)乙二胺四乙酸鹽(EDTA)常用的有鈉鹽和鉀鹽,能與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物,使鈣離子失去凝血作用,從而達(dá)到抗凝目的。對(duì)血細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)影響很小,適用于多項(xiàng)血液學(xué)檢查,尤其是血小板計(jì)數(shù),但鈉鹽溶解度低于鉀鹽,EDTA-K2最適用于全血細(xì)胞分析及血細(xì)胞比容測(cè)定,室溫下6h,紅細(xì)胞體積不改變。國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)建議血細(xì)胞計(jì)數(shù)使用EDTA-K2作為抗凝劑,用量為EDTA-K2-2H2O 1.5~2.2mg/ml血液。EDTA可抑制血小板聚集,不適用于凝血檢查及血小板功能試驗(yàn)。


參考資料:化學(xué)發(fā)光、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)信息網(wǎng)等,如涉及侵權(quán),請(qǐng)聯(lián)系刪除。

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